课程编号：031603 课程性质：课程实验
课程名称：环境工程微生物 英文名称：Microbiology in Environmental Engineering
隶属课群：环工专业基础 课程总学时：56
实验学时：16 上机学时：0
适用专业：环境工程
一、本课程实验教学性质、目的和任务：
《环境工程微生物学》是环境工程专业必修的实践性专业课，是系统专业学习过程中必不可少的教学环节。开设此课程的目的在于培养学生基本的工程素质。提高学生分析问题和解决问题的能力以及实际动手操作能力，是为了进一步夯实专业课程的学习。本课程的基本任务在于让学生掌握理解环境工程专业基础知识，三废处理、处置的相关模型及基本原理、方法，获得一定的实践操作技能。
二、实验教学的主要内容和基本要求：
1. 掌握微生物实验基本操作方法
2. 掌握环境中微生物的基本分类及培养方法
3. 掌握环境微生物的基本性质
4. 掌握环境中主要监测的微生物指标及监测方法
三、实验项目及学时分配表
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序号 |
实验项目名称 |
计划学时 |
实验类型 |
开出要求 |
每组人数 |
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1 |
光学显微镜的使用与保护 |
2 |
验证 |
必开 |
2 |
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2 |
几种基本细菌形态的观察 |
2 |
验证 |
必开 |
2 |
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3 |
微生物细胞数的计数 |
2 |
验证 |
必开 |
2 |
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4 |
微生物染色及革氏阴阳细菌区分 |
2 |
验证 |
必开 |
2 |
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5 |
细菌培养基的制备和灭菌 |
2 |
验证 |
必开 |
2 |
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6 |
细菌的纯种分离、培养及接种技术 |
2 |
验证 |
必开 |
2 |
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7 |
纯种细菌菌落形态及个体形态观察 |
2 |
验证 |
必开 |
2 |
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8 |
空气中微生物总量的检测 |
2 |
验证 |
必开 |
2 |
四、实验项目教学大纲
实验一 光学显微镜的使用与保护
（一）实验类型：验证
（二）实验目的：掌握光学显微镜的结构、原理，学习显微镜的操作方法和保养。
（三）实验内容：
严格按光学显微镜的操作方法，依低倍、高倍及油镜的次序逐个观察水中细菌、空气中细菌及土壤中细菌的细菌示范片，用铅笔分别绘出各种细菌的形态图。
（四）实验要求:
1. 认真预习，明确实验的目的、任务、原理、操作的主要步骤和注意事项，完成预习报告。
2. 严格遵守操作程序，细心观察，积极思考，及时整理、计算和分析实验结果和数据。
3. 自觉遵守实验室规则，保持实验室整洁安静，仪器安置有序，注意节约和安全，预防发生意外事故。
4. 实验完毕后，洗涤、清理仪器，切断（或关闭）电源、水阀和气路。
（五）主要仪器设备：
1.显微镜、擦镜纸、香柏油、二甲苯
2.示范片：分别取废水、大气、土壤样本培养细菌
实验二 几种基本细菌形态的观察
（一）实验类型：验证
（二）实验目的：
1.进一步熟悉和掌握显微镜的操作方法。
2.观察几种微生物的个体形态，掌握生物图的绘制方法。
3.学会用压滴法制作标本片。
（三）实验内容：
1.严格按显微镜的操作方法，用低倍镜和高倍镜观察细菌示范片，绘制其形态图。
2.用压滴法制作微生物的标本片。
（四）实验要求:
1．认真预习，明确实验的目的、任务、原理、操作的主要步骤和注意事项，完成预习报告。
2．严格遵守操作程序，细心观察，积极思考，及时整理、计算和分析实验结果和数据。
3．自觉遵守实验室规则，保持实验室整洁安静，仪器安置有序，注意节约和安全，预防发生意外事故。
4．实验完毕后，洗涤、清理仪器，切断（或关闭）电源、水阀和气路。
（五）主要仪器设备：
1．显微镜、擦镜纸、吸水纸
2．各种细菌示范片，水、土、气标本
实验三 微生物细胞数的计数
（一）实验类型：验证
（二）实验目的：
了解血球计数板的结构，掌握使用和技术方法
（三）实验内容：
稀释样品，并用血球计数板计数
（四）实验要求:
1．认真预习，明确实验的目的、任务、原理、操作的主要步骤和注意事项，完成预习报告。
2．严格遵守操作程序，细心观察，积极思考，及时整理、计算和分析实验结果和数据。
3．自觉遵守实验室规则，保持实验室整洁安静，仪器安置有序，注意节约和安全，预防发生意外事故。
4．实验完毕后，洗涤、清理仪器，切断（或关闭）电源、水阀和气路。
（五）主要仪器设备：
显微镜、血球计数板、移液管、微生物培养液
实验四 微生物染色及革氏阴阳细菌区分
（一）实验类型：验证
（二）实验目的：
学习微生物的染色原理、染色的基本操作技术，从而掌握微生物的一般染色法和革兰氏染色法。
（三）实验内容：
1．细菌的简单染色
2．细菌的革兰氏染色
（四）实验要求:
1．认真预习，明确实验的目的、任务、原理、操作的主要步骤和注意事项，完成预习报告。
2．严格遵守操作程序，细心观察，积极思考，及时整理、计算和分析实验结果和数据。
3．自觉遵守实验室规则，保持实验室整洁安静，仪器安置有序，注意节约和安全，预防发生意外事故。
4．实验完毕后，洗涤、清理仪器，切断（或关闭）电源、水阀和气路。
（五）主要仪器设备：
1．显微镜、香柏油、二甲苯、擦镜纸、吸水纸、接种环、载玻片、酒精灯
2．美蓝染色液、草酸铵结晶紫染色液、革氏碘液、95％乙醇、蕃红染液
3．革氏阴性及阳性菌
实验五 细菌培养基的制备和灭菌
（一）实验类型：验证
（二）实验目的：
1．熟悉玻璃器皿的洗涤和灭菌前的准备工作。
2．掌握培养基和无菌水的制备方法。
3．掌握高压灭菌技术。
（三）实验内容：
1．玻璃器皿的洗涤和包装
2．培养基的制备
3． 无菌稀释水的制备
4．灭菌
（四）实验要求:
1．认真预习，明确实验的目的、任务、原理、操作的主要步骤和注意事项，完成预习报告。
2．严格遵守操作程序，细心观察，积极思考，及时整理、计算和分析实验结果和数据。
3．自觉遵守实验室规则，保持实验室整洁安静，仪器安置有序，注意节约和安全，预防发生意外事故。
4．实验完毕后，洗涤、清理仪器，切断（或关闭）电源、水阀和气路。
（五）主要仪器设备：
1．培养皿，试管，移液管，锥形瓶，烧杯，玻璃珠
2．纱布、棉花、牛皮纸
3．精密pH试纸、10％HCL、10％NaOH
4．牛肉膏、蛋白胨、氯化钠、琼脂、蒸馏水
5．高压蒸汽灭菌锅、烘箱、电炉
实验六 细菌的纯种分离、培养及接种技术
（一）实验类型：验证
（二）实验目的：
1．掌握从环境中分离培养细菌的方法，从而获得若干种细菌的纯培养技能。
2．掌握几种接种技术。
（三）实验内容：
1．平板划线法
2．斜面接种
3． 穿刺接种
（四）实验要求:
1．认真预习，明确实验的目的、任务、原理、操作的主要步骤和注意事项，完成预习报告。
2．严格遵守操作程序，细心观察，积极思考，及时整理、计算和分析实验结果和数据。
3．自觉遵守实验室规则，保持实验室整洁安静，仪器安置有序，注意节约和安全，预防发生意外事故。
4．实验完毕后，洗涤、清理仪器，切断（或关闭）电源、水阀和气路。
（五）主要仪器设备：
1．无菌培养皿，无菌试管，无菌移液管
2．营养琼脂培养基、无菌稀释水
3．接种环、酒精灯、恒温箱
实验七 纯种细菌菌落形态及个体形态观察
（一）实验类型：验证
（二）实验目的：
观察实验六分离出来的几种细菌的个体形态及相应的菌落形态特征
（三）实验内容：
1．细菌菌落形态的观察
2．各种细菌菌落特征的比较
（四）实验要求:
1．认真预习，明确实验的目的、任务、原理、操作的主要步骤和注意事项，完成预习报告。
2．严格遵守操作程序，细心观察，积极思考，及时整理、计算和分析实验结果和数据。
3．自觉遵守实验室规则，保持实验室整洁安静，仪器安置有序，注意节约和安全，预防发生意外事故。
4．实验完毕后，洗涤、清理仪器，切断（或关闭）电源、水阀和气路。
（五）主要仪器设备：
1．显微镜、载玻片、接种环、酒精灯
2．实验六培养出的各种细菌
实验八 空气中微生物总量的检测
（一）实验类型：验证
（二）实验目的：
测定大气中微生物的总量，掌握将大气中微生物固定至无菌水中的方法。
（三）实验内容：
1．大气中微生物的固定
2．大气中微生物总量的检测
（四）实验要求:
1．认真预习，明确实验的目的、任务、原理、操作的主要步骤和注意事项，完成预习报告。
2．严格遵守操作程序，细心观察，积极思考，及时整理、计算和分析实验结果和数据。
3．自觉遵守实验室规则，保持实验室整洁安静，仪器安置有序，注意节约和安全，预防发生意外事故。
4．实验完毕后，洗涤、清理仪器，切断（或关闭）电源、水阀和气路。
（五）主要仪器设备：
1．固定设备一套（下口瓶、导管、锥形瓶、漏斗）
2．无菌水、营养琼脂培养基、接种环
五、考核与评分
实验成绩占课程考试成绩的20％-30％，实验成绩以出勤率及试验报告成绩综合考核。
制定单位：材料与化工学院
制 定 人：赵菁
审 核 人：陈山川
批 准 人：王正品
制定（或修订）时间：2010.6.20
